设为首页 收藏本站 English

当前位置: 雄盛机械网 >> 最新文章

灵敏RNA成像1种基老玩具于RNA的催化发夹组装电路的遗传编码

发布时间:2019-07-29 13:29:41

灵敏RNA成像:1种基老玩具于RNA的催化发夹组装电路的遗传编码

DNA和RNA折叠成精确纳米结构的能力已被用于各种生物学和生雕版机物医学领域。这些核酸精确自组发卡装的纳米结构为可编程份子辨认工具的开发创造了很好的平台。在过去的10年中,已设计了1系列复杂的基气溶胶于核酸的电路并利用于生物分析检测。其中催化发夹组件(CHA)已被证明是其中的1种。这些无酶等温CHA电路具有快速有效的信号放大、背景低、周转率高的优点。基于这些高度的敏感性和靶向特异性CHA反应的DNA电路已利用于各种体外无细日野配件胞分析,包括核酸、小份子和蛋白质的检测和定量分析。但是大多数基于DNA的电路的细胞内功能存在生物递送和降解困难的缺点。而另外一方面,RNA份子是可以在生命系统内进行遗传编码和转录的。因此,基于RNA的电路和装置在细胞内利用应当是具有很大的潜力。

【成果简介】

近日,美国马萨诸塞大膨化机学的尤明旭教授(通讯作者)等报导了1种基于RNA的催化发夹组装电路的遗传编码,用于活细胞内的灵敏RNA成像。荧光RNA适体Broccoli的分裂情势用作报导份子。1种靶RNA可以催化地触发数10至数百个Broccoli的荧光,可以灵敏地靶向的检测RNA。并且进1步优化他们设计的电路,可以轻松的编程以便靶向各种RNA序列进行成像。该设计原理为开发用制冰机于细胞利用的各种基因编码RNA电路开辟了新的舞台。研究成果以题为“Genetically棉花糖机 Encoded Catalytic Hairpin Assembly for Sensitive RNA Imaging in Live Cells环保设施”发布在国际著名期刊JACS上。

【图文导读】

图1、CHARGE的电路原理图

图2、不同料位的序列设计优化CHARGE的信噪比

图3、D2 CHARGE系统的体外表征

(a)有或无靶标防晒用品下,Broccoli和CHARGE电路的荧光发射光谱;

(b)D2 CHARGE对不同浓度靶标的荧光响应;

(c)加耳机芯入不同量的目标时CHARGE电路的动力学图;

(d花兰螺丝)Mg2+浓度对CHARGE电路的影响。

图4、活BL21(DE3)*细胞进行共聚焦荧光成像

图5、模块化CHARGE系统可检测各种RNA靶标

(a)基于份子信标的目标检测示意图;

(b)用份子信标结合的D2 CHARGE体外检测miR21和SgrS;

(c)添加不同量葡萄糖及其细胞荧光强度散布后,表达H1+H2+MBSgrs的细胞的共聚焦荧光成像图。螺柱

图6、基泵壳于HHR系统的茶碱调理细胞RNA水平

(a)茶碱引诱的HHR自切割和分离设备靶标RNA释放的示意图;

(b)不同浓度的茶碱的体外荧光测定;

个性颈饰(c)加入不同浓度的茶碱2 h后,10-base-long抑制剂掺入的HHR系统的10%变性PAGE凝胶表征;

(d)不膨化机械同浓度的茶碱处理的茶碱-HHR构建体的共聚焦荧光成像图。

【小结】

研究引入了1种新型的基因编码RNA电路,可以进行高灵敏度地检测细胞R显示芯片NA靶标。这些CHAR亚硝酸钠GE电路可以很容易地编程,以流量开关对活细胞中的各种RNA靶标进行成像。即便在细菌细胞中,当前的电路也得到证实,CHARGE确切也具有真核细胞研究的潜力。类似于用于体外分析的催保温材料化发夹组装电路的通用利用平台,可以开发出各种CHARGE以进1步电子玩具检测其他细胞RNA、蛋白质和小份子,和用于遗传拓展调理测试设备的开关。该研究为利用遗传编码的RNA电路开发细胞利用开辟了新的方法。

文献链接:Genetically 注射模具Encoded Catalytic Hairpin Assembly for Sensitive RNA Imaging in Live Cells(JACS,2018,DOI:10.1021/jacs.8b03956)

友情链接